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鹅细小病毒SS/10株VP3蛋白的原核表达及鉴定
作者: 胡自立 ; 刘海玲 ; 张光明 ; 张凯 ; 高瑞娟 ; 罗开健
关键词: 鹅细小病毒 VP3基因 原核表达
摘要:根据GenBank收录的鹅细小病毒(GPV)基因序列,设计并合成了一对VP3基因扩增引物。采用PCR技术对SS/10株的VP3基因进行扩增,将目的基因和原核表达载体PET-32a分别经HindⅢ和BamHⅠ双酶切后进行连接,获得重组质粒PET-32a-VP3,并将其转化表达菌BL21(DE3)pLysS。经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了72ku左右的融合蛋白,大部分以包涵体的形式存在于菌体中。Wesern blot结果表明,该蛋白能与GPV阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
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