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不同冷冻保护剂和冷冻方法对小鼠耳皮肤成纤维细胞冻存效果的影响
作者: 肖雄 ; 邓玉金 ; 赵海龙 ; 吴有博 ; 李跃民
关键词: 冷冻保存 解冻 耳皮肤成纤维细胞 小鼠
摘要：通过比较不同冷冻保存方法和冷冻保护剂对小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻-解冻复苏后细胞存活率、48h贴壁率和细胞生长曲线的影响,筛选适宜的小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存方法和冷冻保护剂。结果表明,以100mL/L二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂进行小鼠耳皮肤成纤维细胞冷冻保存时,方法3处理组解冻复苏后细胞存活率和培养48h细胞贴壁率均高于方法2处理组（P〉0.05）,并分别极显著高于方法1和方法4。采用方法3进行冷冻保存时,以100mL/L DMSO作为冷冻剂的细胞贴壁率显著高于100mL/L甘油（GL）组（P〈0.05）,且冷冻解冻后的细胞呈现正常的分裂增殖生长模式。因此,宜选择100mL/L胎牛血清（FBS）＋100mL/L DMSO＋DMEM作为冷冻保护液,采用方法3进行小鼠耳皮肤成纤维细胞的冷冻保存。