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程序性细胞死亡因子5夹心ELISA检测方法的建立及初步应用
作者: 王云龙 [1,2] ; 赵素华 [1] ; 陈英玉 [3] ; 李玉林 [4] ; 刘旺根 [4] ; 王继创 [4] ; 王国强 [4] ; 孙新城 [4] ; 董彩文 [4] ; 程蕾 [4] ; 李恒思 [4]
关键词: 程序性细胞死亡因子5 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 癌症 免疫缺陷病
摘要：建立一种快速检测人血清中程序性细胞死亡因子5（PDCD 5）的酶联免疫吸附试验（ELISA）方法,初步研究PDCD 5蛋白在血清中含量变化与疾病的相关性。用抗PDCD 5多克隆抗体包被酶标板,高碘酸钠法标记PDCD 5单克隆抗体作为酶标抗体,以PDCD 5重组蛋白为标准蛋白绘制标准曲线,以特异性、稳定性和灵敏度对ELISA方法进行评价。检测81份癌症患者及21份类风湿性关节炎患者血清,探讨血清PDCD 5蛋白与癌症、免疫缺陷病的相关性。经双扩散试验检测标记后的抗体和酶都具有生物学活性,初步建立了检测人血清PDCD 5蛋白的定量ELISA方法,该方法具有良好的特异性、稳定性,灵敏度达0.5ng/mL。临床检测应用表明,类风湿性关节炎患者血清PDCD 5含量明显高于正常人血清,癌症患者血清PDCD 5蛋白水平明显低于正常人含量（P〈0.05）,各种癌症患者之间PDCD 5含量差异不显著（P〉0.05）。成功建立了一种检测人血清PDCD5的定量ELISA方法,为疾病的诊断提供临床参考。