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胃蛋白酶原Ⅱ单抗制备及夹心ELISA的初步建立
作者: 张红绪 [1] ; 孙青芸 [1] ; 王继创 [2] ; 李恒思 [2] ; 张怡青 [1] ; 董彩文 [3] ; 李玉林 [2] ; 刘旺根 [3] ; 景建洲 [3] ; 王云龙 [4]
关键词: 胃蛋白酶原 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
摘要:制备配对胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)单抗,建立人血清中胃蛋白酶原Ⅱ夹心ELISA检测方法。用胃蛋白酶原Ⅱ免疫Balb/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0融合,用HAT培养基进行筛选培养,间接ELISA检测阳性克隆,对阳性孔进行多次单克隆化,选出效价高、分泌性能稳定的杂交瘤细胞,制备腹水并进行纯化。进行单抗配对,建立胃蛋白酶原Ⅱ双抗体夹心检测方法。获得1D8、1C6、2H11、2E3等4株杂交瘤,经配对试验,确定1D8、2H11可作为夹心ELISA检测PGⅡ的单抗。成功制备出配对单抗,初步建立了PGⅡ双抗体夹心ELISA方法。
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