弓形虫ROP18基因重组蜥蜴利什曼原虫的构建及鉴定

作者: 李博 [1] ; 魏峰 [1] ; 刘全 [2] ; 马洪霞 [3] ; 许越 [1] ; 金洪涛 [2] ; 商立民 [2]

关键词: 蜥蜴利什曼原虫弓形虫ROP18基因重组蛋白

摘要：用PCR方法从弓形虫RH株全基因组中扩增ROP18基因,将其克隆至pMD18-T载体,经测序分析后,构建真核表达穿梭质粒pLEXSY-neo2-ROP18;利用电转染技术将外源基因表达盒转入蜥蜴利什曼原虫,G418筛选阳性克隆;阳性克隆分离培养后提取基因组,用ROP18特异性引物及同源重组鉴定引物进行重组利什曼原虫PCR鉴定,结果阳性虫体中扩增出特异性目的条带;应用鼠抗弓形虫多抗血清以Western blot印记法从蛋白水平进行重组蛋白检测,证明目的蛋白在蜥蜴利什曼原虫中得到表达。

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弓形虫ROP18基因重组蜥蜴利什曼原虫的构建及鉴定

作者: 李博 [1] ; 魏峰 [1] ; 刘全 [2] ; 马洪霞 [3] ; 许越 [1] ; 金洪涛 [2] ; 商立民 [2]

关键词: 蜥蜴利什曼原虫 弓形虫ROP18基因 重组蛋白

关键词: 蜥蜴利什曼原虫弓形虫ROP18基因重组蛋白