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禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
作者: 谢华丽 [1] ; 邵华斌 [2] ; 杨峻 [2] ; 程国富 [1] ; 胡薛英 [1] ; 谷长勤 [1] ; 张万坡 [1] ; 罗青平 [2]
关键词: 禽白血病病毒 p27蛋白 单克隆抗体
摘要:以纯化的禽白血病病毒p27重组蛋白作为免疫原,按常规方法免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,通过细胞培养和有限稀释法制备单克隆抗体,最终获得了3株能稳定分泌禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体的细胞株2F3、5C2和5C7。经生物学特性分析,3株杂交瘤细胞染色体数均为90条左右,通过ELISA、Western blot和间接免疫荧光等方法对所获得的3株单克隆抗体进行了鉴定,证明3株单克隆抗体细胞株所分泌的抗体效价高,而且均能够和禽白血病病毒p27蛋白特异性发生反应。说明该3株单克隆抗体均具有与禽白血病病毒p27蛋白发生反应的反应原性。3株单克隆抗体的成功获得为禽白血病病毒抗原表位的分析,病毒的检测以及试剂盒的研发奠定了基础。
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