兔出血症病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者: 肖跃强 [1,2] ; 谢金文 [2] ; 徐二丹 [3] ; 沈志强 [2] ; 丁壮 [1]

关键词: 兔出血症病毒实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应建立

摘要：为建立一种敏感、特异、简便的兔出血症病毒（RHDV）检测方法,根据GenBank中公布的RHDV全基因组序列保守区域设计了2对引物,筛选了其中1对建立并优化了PCR条件,扩增产物为331bp,并基于此建立了SYBR GreenⅠ荧光染料real-time RT-PCR检测方法。通过敏感性、特异性、标准曲线建立等表明,该方法可检出101以上拷贝数的模板,只在RHDV有特异性扩增,标准曲线线性相关性好。实际应用结果显示,该方法对疑似RHDV病料检测的阳性率为74.8%,而普通RT-PCR方法检测的阳性率为65.5%。该方法的建立为开展该病的诊断、疫苗制备质控等提供了有效的技术保障。

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兔出血症病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作者: 肖跃强 [1,2] ; 谢金文 [2] ; 徐二丹 [3] ; 沈志强 [2] ; 丁壮 [1]

关键词: 兔出血症病毒 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 建立

关键词: 兔出血症病毒实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应建立