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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

产肠毒素大肠埃希菌STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体的构建及表达

作者: 邓光存 [1,2] ; 包少文 [1,2] ; 杨继辉 [1,2] ; 曾瑾 [1,2] ; 李武 [1,2] ; 刘晓明 [1,2]

关键词: 产肠毒素大肠埃希菌 耐热性肠毒素 黏附素 重组腺病毒载体

摘要:为构建产肠毒素大肠埃希菌(ETEC) STa-K99融合蛋白重组腺病毒载体Ad STa-K99,通过PCR技术分别克隆了STa及K99基因,并与腺病毒穿梭质粒连接构建了穿梭质粒pAd5 STa-K99,将pAd5STa-K99和骨架质粒(含GFP基因)分别用Pac Ⅰ酶切线性化,利用LipofectamineTM LTX&-PLUS共转染293细胞进行同源重组包装重组腺病毒,通过PCR及Western blot对重组腺病毒进行鉴定.结果显示,重组腺病毒Ad5 STa-K99构建正确并表达融合蛋白,且表达的融合蛋白能够被抗体所识别,为研制由ETEC引起的新生动物腹泻重组腺病毒载体疫苗奠定了基础.


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