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肠炎沙门菌fliC蛋白的表达及ELISA检测方法的建立
作者: 邓显文 ; 谢芝勋 ; 刘加波 ; 谢志勤 ; 庞耀珊 ; 谢丽基 ; 范晴 ; 罗思思
关键词: 肠炎沙门菌 fliC鞭毛蛋白 间接ELISA
摘要:为了给临床检测肠炎沙门菌提供一种切实可行的血清学方法,本研究根据肠炎沙门菌(SE)鞭毛蛋白基因(fliC)序列设计一对引物,利用PCR扩增出fliC基因大小为285bp,克隆到表达载体pGEX-4T-1中,成功构建重组质粒pGEX-4T-fliC。将重组质粒pGEX-fliC转化大肠埃希菌DH5诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析鉴定,表达的水溶性重组蛋白大小为37ku,有较好的反应原性。以重组蛋白GST-fliC为包被抗原建立间接ELISA检测肠炎沙门菌抗体的方法,为肠炎沙门菌的检测提供一种敏感度高、特异性强的检测方法。
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