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丝状支原体山羊亚种假定可变表面脂蛋白基因的克隆及原核表达
作者: 徐春光 [1,2] ; 高明华 [2] ; 赵艳芳 [3] ; 郝瑞霞 [1] ; 郝永清 [1]
关键词: 丝状支原体山羊亚种 假定可变表面脂蛋白基因 系统进化分析 原核表达
摘要：利用PCR技术对丝状支原体山羊亚种标准株PG3的假定可变表面脂蛋白基因进行了克隆、序列测定及遗传进化分析，并将其编码成熟肽的基因区域克隆到表达载体pET-32a（＋）上进行了原核表达。遗传进化分析结果表明，该基因的核苷酸序列与丝状支原体山羊亚种GM12株的可变脂蛋白基因序列MMCAP2—0900同源性最高（959／6）。并且其氨基酸序列结构与丝状支原体簇中已报道的其他可变表面脂蛋白的氨基酸序列结构高度相似。SDS-PAGE和Westernblot结果显示，重组蛋白的分子质量约为31ku。本研究克隆并表达了丝状支原体山羊亚种PG3标准株的假定可变表面脂蛋白基因，该基因与丝状支原体山羊亚种95010和GM12株的预测的可变表面脂蛋白基因簇具有亲缘关系，同为可变表面脂蛋白基因家族成员。