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鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备
作者: 崔鹏飞 [1,2,3] ; 邓国华 [3] ; 韦良孟 [1,2] ; 焦培荣 [1,2] ; 廖明 [1,2]
关键词: 鸡干扰素调节因子7 原核表达 多克隆抗体
摘要:为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT—PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a—chIRF7。将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil)BL-21(DE3)后经IPTG诱导,SDS—PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60ku。将纯化的重组蛋白免疫接种小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA测定血清抗体滴度在1:51200以上,IFA检测结果显示制备的鼠抗chIRF7蛋白多抗能够与AIv刺激的CEF细胞内的chIRF7蛋白发生特异性反应,表明通过原核表达系统表达的重组蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其制备的鼠抗chIRF7蛋白多克隆抗体滴度高、特异性好。
上一篇:伪狂犬病病毒EP0基因的克隆及原核表达
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