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牛病毒性腹泻病毒E2基因在昆虫细胞中的表达
作者: 范晴 ; 谢芝勋 ; 刘加波 ; 庞耀珊 ; 邓显文 ; 谢志勤 ; 谢丽基 ; 罗思思
关键词: 牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白 杆状病毒表达体系 昆虫细胞
摘要：为了获得具有良好抗原性的牛病毒性腹泻病毒E2囊膜蛋白，利用PCR方法扩增牛病毒性腹泻病毒E2基因，连接于昆虫杆状病毒表达载体中，构建pFastBacHTA-E2重组质粒。将该重组质粒转化入DHl0BAC感受态细胞，经PCR鉴定获得转座杆粒Bacmid—E2。转座杆粒Bacmid-E2转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒，感染细胞后，收获得到目的蛋白，用sDS—PAGE和Westernblot对重组的表达蛋白进行分析。结果表明，重组E2蛋白大小为43．6ku，与预期值相符，该蛋白能与牛病毒性腹泻病毒阳性血清发生特异性反应，为进一步研发牛病毒性腹泻病毒ELISA抗体检测试剂盒奠定基础。