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细粒棘球绦虫G1型Eg95基因的原核表达及蛋白鉴定
作者: 徐丹 [1,2] ; 曹利利 [2,3] ; 魏峰 [1] ; 杨关英 [1] ; 张莹光 [1,2] ; 商立民 [2] ; 刘全 [2]
关键词: 细粒棘球绦虫 Eg95 原核表达 Western blot分析
摘要:根据GenBank发表的细粒棘球绦虫G1型Eg95序列合成Eg95抗原基因(HM345604.1),设计并合成一对引物,采用PCR技术扩增Eg95抗原基因,亚克隆到pET-28a原核表达载体,并在大肠埃希茵BL21(DE3)中表达重组蛋白。经IPTG诱导,SDS—PAGE分析,Eg95抗原蛋白可以在大肠埃希菌中高效表达,表达重组蛋白的分子质量约为16.5ku。Westernblot结果表明,该蛋白可与阳性血清发生特异反应,具有很好的反应原性。