多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

作者: 张爱芹 [1,2] ; 郭东春 [2] ; 刘家森 [2] ; 原冬伟 [2] ; 姜骞 [2] ; 林欢 [2] ; 崔玉东 [1] ; 曲连东 [2]

关键词: 多杀性巴氏杆菌 purF基因原核表达多克隆抗体

摘要：为了获得多杀性巴氏杆菌PurF蛋白及其多克隆抗体，通过PCR扩增了多杀性巴氏杆菌C51—17株purF基因，将其克隆到表达载体pPROEX—HTa中，构建重组表达质粒pHT—PurF，转化至大肠埃希菌BL21（DE3）感受态细胞中，经IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测表明，获得重组蛋白分子质量约56．5ku，主要以包涵体形式存在；Western blot检测表明，表达的蛋白可与多杀性巴氏杆菌制备的高免血清发生特异性反应。将制备的重组蛋白免疫Balb／e小鼠制备多克隆抗体，ELISA检测血清抗体效价，结果显示制备的多克隆抗体滴度达到1：128000，Western blot表明可与多杀性巴氏杆菌PurF蛋白发生反应。本研究制备了多杀性巴氏杆菌的PurF蛋白及其多克隆抗体，为进一步研究PurF蛋白在多杀性巴氏杆菌致病中的作用奠定了基础。

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多杀性巴氏杆菌PurF蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

作者: 张爱芹 [1,2] ; 郭东春 [2] ; 刘家森 [2] ; 原冬伟 [2] ; 姜骞 [2] ; 林欢 [2] ; 崔玉东 [1] ; 曲连东 [2]

关键词: 多杀性巴氏杆菌 purF基因 原核表达 多克隆抗体

关键词: 多杀性巴氏杆菌 purF基因原核表达多克隆抗体