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对虾白斑综合征病毒VP12的原核表达及其与VP24和VP26的相互作用
作者: 马方方 [1,2] ; 刘庆慧 [2] ; 黄使 [2]
关键词: 对虾白斑综合征病毒 VP12 原核表达 VP24 VP26 相互作用
摘要:根据GenBank上对虾白斑综合征病毒(WSSV)囊膜蛋白基因VP12(wsv432)的序列,设计并合成引物,PCR扩增得到VP12基因,构建重组表达载体pBAD/gill—VP12并转化大肠埃希菌Top10感受态细胞。基因工程菌株在37℃用L-阿拉伯糖诱导,表达产物经Westernblot和SDS-PAGE检测豆示有与预期大小19ku相符合的目的蛋白。以Co^2+亲和层析方法,获得纯化VP12蛋白。采用Far-Western blot结合ELISA方法,分析VP12与WSSV结构蛋白的作用。结果表明,VP12与囊膜蛋白VP24、VP26具有相互作用,该研究对于揭示WSSV分子组装机制,阐明其致病机理具有重要意义。