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山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌双重 PCR 检测方法的建立
作者: 亢宁宁 ; 刀筱芳 ; 冯旭飞 ; 虎啸 ; 马晓楠 ; 杨发龙
关键词: 山羊支原体山羊肺炎亚种 多杀性巴氏杆菌 双重PCR
摘要：为建立一种能够同时检测山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌的双重 PCR 方法，本研究采用2对特异性引物，对退火温度和引物浓度比进行了优化，成功建立了一种能同时检测上述两种病原的双重PCR方法。结果显示，该方法具有很好的特异性，仅对山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌有扩增，而对其他常见的羊呼吸道病原无扩增；该方法对两种病原的检测限分别为32pg和50pg，与单独 PCR相同；26份临床样品中山羊支原体山羊肺炎亚种的检出率为23．1％，多杀性巴氏杆菌的检出率为26．9％。所建立的双重PCR具有特异性好、灵敏度高的特点，为临床上这两种病原感染的快速诊断和流行病学调查等提供了更为有用的手段。