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致羔羊脑炎粪肠球菌XJ05 LuxS基因的克隆与原核表达
作者: 郭秉娇 ; 卢帅 ; 王熙楚 ; 郑婷婷 ; 周霞 ; 剡根强
关键词: 粪肠球菌 LuxS基因 序列分析 原核表达
摘要：采用PCR技术从致羔羊脑炎粪肠球菌CJ05基因组中扩增得到LuxS基因的全序列，对其进行分析，同时与其他细菌相应基因序列及编码的氨基酸进行同源性分析；构建该基因的原核表达载体，对表达蛋白进行鉴定。结果显示，该粪肠球菌XJ05的LuxS基因全长459bp，编码152个氨基酸，具有功能序列HXXEH，核苷酸同源性与GenBank上的枯草芽胞杆菌和粪肠球菌V583同源性最高，分别为61．2％和100％；构建的重组质粒经诱导后表达分子质量为20ku的蛋白质，Westernblot检测显示特异性条带。说明XJ05的luxS基因与肠球菌V583和枯草芽胞杆菌亲缘关系较近，表达的重组蛋白具有良好的反应原性。