利用多肽抗原建立同时检测 CSFV 和PRRSV 抗体的胶体金免疫层析方法

摘要：利用合成多肽作为抗原，建立一种同时检测猪瘟病毒（CSFV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体的胶体金免疫层析方法。用人工筛选合成的 CSFV 多肽和 PRRSV 多肽葡聚糖偶联物作为包被抗原，以多肽-Biotin-链霉亲和素作为胶体金标记物，羊抗猪 IgG 包被硝酸纤维膜作为质控带，建立了同时检测CSFV 和 PRRSV 抗体的胶体金免疫层析方法（GICA）。结果表明，多肽与葡聚糖和生物素的偶联效率较高，分别为84．65％和91．37％；链霉亲和素与胶体金结合最佳 pH 和最佳标记量分别为8．2μg／mL 和30μg／mL。试纸卡灵敏度试验表明，血清1∶80稀释仍可检出，与 Idexx ELISA 试剂盒检出结果基本一致，特异性良好，不与伪狂犬病病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒和细小病毒的阳性血清发生交叉反应。与 Idexx ELISA 试剂盒平行检测结果表明，CSFV 抗体总体符合率为86．36％；PRRSV 抗体总体符合率为83．33％。说明利用偶联多肽制备的试纸卡灵敏度高，特异性好，能够同时检测两种病毒抗体，适于基层养殖场使用。