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小反刍兽疫病毒H蛋白的原核表达和免疫学活性鉴定
作者: 陶虹 [1,2] ; 孙洁 [1,2] ; 李健波 [2] ; 刘建利 [1,2] ; 阮周曦 [1] ; 张彩虹 [1,2] ; 曹琛福 [1] ; 吕建强 [1] ; 花群义 [1] ; 杨俊兴 [1,2]
关键词: 小反刍兽疫病毒 H蛋白 原核表达
摘要:研究小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)H 蛋白生物学活性,为建立PPRV 抗体检测方法提供材料。根据 GenBank 已发表的 PPRV H 蛋白质序列,设计上、下游引物,以 PPRV核酸为模板进行 PCR 扩增,扩增产物克隆至 pET52/LIC 载体中,构建了 pET52/LIC-PPRV H 表达载体。将 pET52/LIC-PPRV H 重组质粒转化大肠埃希菌 BL21(DE3)进行融合表达,经 SDS-PAGE 电泳分析,可见 PPRV H 蛋白成功得到了表达,融合蛋白的分子质量约为75 ku,Western blot 分析表明所表达的重组蛋白可与 PPRV 阳性血清发生特异性反应,说明表达的 PPRV H 蛋白可以作为建立 PPRV 抗体检测的蛋白。
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