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禽肺炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
作者: 谢志勤 ; 谢芝勋 ; 刘加波 ; 庞耀珊 ; 邓显文 ; 谢丽基 ; 范晴 ; 罗思思
关键词: SYBR GreenⅠ 实时荧光定量RT-PCR 检测 禽肺炎病毒
摘要：根据C亚型禽肺炎病毒F基因序列,设计了一对针对C亚型禽肺炎病毒的特异性引物,应用该引物建立了SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测C亚型禽肺炎病毒的方法,并对建立的方法进行特异性、敏感性测定和临床样品检验。经检验该方法能特异性地鉴别检测禽肺炎病毒,特异性好;敏感性可检测到10个拷贝的禽肺炎病毒质粒DNA模板;对收集的54份鸡肺病料样品进行检测,没有检测到C亚型禽肺炎病毒阳性病料。建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法检测C亚型禽肺炎病毒具有特异、敏感、快速、定量等优点,用该方法检测证实,采集的临床样品中还没有C亚型禽肺炎病毒的存在。
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