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空肠弯曲菌和沙门菌双重实时荧光定量PCR检测方法的建立
作者: 高瑞娟 ; 张凯 ; 吕嘉敏 ; 黄永兴 ; 罗开健
关键词: 空肠弯曲菌 沙门菌 双重实时荧光定量PCR TaqMan探针
摘要:为建立一种空肠弯曲菌和沙门菌的双重实时荧光定量PCR检测方法,根据空肠弯曲菌的保守基因hipO和沙门菌的保守基因invA分别设计合成引物和TaqMan探针,分别使用FAM、JOE作为探针报告基团,TAMRA作为探针淬灭基团。优化反应体系及条件,建立适用于检测食品中空肠弯曲菌和沙门菌的双重实时荧光定量PCR方法。结果显示,该检测方法特异性强,灵敏度高,空肠弯曲菌检测限可达10CFU/mL,沙门菌检测限达230CFU/mL。表明建立的双重实时荧光定量PCR可为实现食品中空肠弯曲菌和沙门菌的同时检测提供新方法。