一氧化氮合酶在绵羊卵母细胞体外成熟及胚胎发育中的表达

摘要：为了解一氧化氮合酶（NOS）的3个亚型在绵羊早期胚胎发育过程中的表达情况,明确一氧化氮（NO）是否参与调控绵羊早期胚胎发育。运用体外培养体系获得成熟卵母细胞及不同阶段早期胚胎（2-细胞胚胎、4-细胞胚胎、8-细胞胚胎、桑葚胚、囊胚）,应用实时荧光定量PCR技术检测目标基因神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、诱导性一氧化氮合酶（iNOS）相对表达情况。结果显示,1在绵羊未成熟卵母细胞、成熟卵母细胞和各发育阶段的早期胚胎,nNOS、eNOS、iNOS mRNA均有表达;2绵羊卵母细胞成熟过程中,nNOS mRNA相对表达量在未成熟卵母细胞期及成熟卵母细胞期均显著高于eNOS、iNOS的表达量（P〈0.05）,并且在成熟卵母细胞中的表达显著高于未成熟卵母细胞（P〈0.05）;3早期胚胎发育过程中,nNOS、iNOS mRNA相对表达水平显著高于eNOS的表达（P〈0.05）,并且表达趋势相似,具体呈现出4-细胞期较2-细胞有降低趋势;8-细胞期的表达量显著升高（P〈0.05）并在桑葚胚期达到最高;到囊胚期出现显著降低（P〈0.05）的表达趋势。研究结果显示,NO可能参与调控绵羊卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程,尤其在8-细胞期到桑葚胚期这一特定阶段可能具有实质性的生理意义;并且在绵羊卵母细胞成熟过程中的NO产生可能主要由nNOS介导,而早期胚胎发育过程中的NO可能主要由nNOS和iNOS共同介导调控。