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布鲁菌环介导等温扩增检测试剂盒的研制
作者: 李秀梅 [1] ; 郭恋 [1] ; 梁智选 [1] ; 李颖 [1] ; 郭立力 [1] ; 石瑜 [1] ; 朱雅宁 [1] ; 王红军 [2]
关键词: 布鲁菌 环介导等温扩增 检测试剂盒 Omp25基因
摘要:利用环介导等温扩增(LAMP)技术建立布鲁菌的检测方法。通过对反应条件的优化,组装布鲁菌LAMP检测试剂盒,并对试剂盒的各项性能进行评价。结果显示,该试剂盒适用于布鲁菌的快速检测,在63℃条件下1h内可检出布鲁菌,其检测限达5copies/μL,特异性为100%,无假阳性和假阴性出现。反复冻融20次或-20℃下贮存1年,均不影响试剂盒的使用效果。对牛奶样品的检测结果显示,阳性检出率为3.33%,与奶牛布鲁菌病PCR诊断技术(NY/T1467-2007)的检测结果相符。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强和稳定性好等特点,可满足大批量样品快速筛选的要求。
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