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新城疫病毒实时荧光RT-LAMP检测方法的建立
作者: 陈兵 [1] ; 胡运发 [1] ; 孙洁 [2] ; 陈书琨 [1] ; 刘建利 [2] ; 曾少灵 [1] ; 曹琛福 [2] ; 张彩虹 [2] ; 阮周曦 [2] ; 林庆燕 [1] ; 吕建强 [1] ; 杨俊兴 [1] ; 花群义 [1] ; 卢体康 [1] ; 秦智锋 [1]
关键词: 新城疫病毒 实时荧光反转录环介导等温扩增 现场检测
摘要：新城疫是影响家禽养殖业的重大动物疫病,建立现场快速分子学检测方法是其防控关键。借助热裂解法抽提病毒RNA,在筛选出最佳核酸染料Calcein的基础上,建立新城疫病毒（NDV）实时荧光反转录环介导等温扩增（rRT-LAMP）检测法,并对该法进行特异性、敏感性及准确性分析。试验结果显示,本试验所建立的NDV-rRT-LAMP方法可有效鉴别NDV,其敏感性可检测至50个基因拷贝,与国家标准实时荧光定量RT-PCR检测法一致；该法特异性强,与AIV、IBV等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应。小规模田间试验显示,该法用于NDV的普查监测,结果可靠。结果表明,建立的NDV-rRT-LAMP检测法可满足NDV现场快速分子检测需求。