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驽巴贝斯虫二温式 PCR 检测方法的建立及初步应用
作者: 张杨 [1] ; 达伊力特 [2] ; 刘进 [3] ; 李佳 [1] ; 巴音查汗 [1]
关键词: 马驽巴贝斯虫 Bc-48 基因 样品检测
摘要:为了建立一种能快速、特异、敏感地检测马驽巴贝斯虫的方法,根据 GenBank 中的驽巴贝斯虫(Babesia caballi )Bc-48基因序列设计了一对特异性引物,建立检测驽巴贝斯虫的二温式 PCR 方法。该方法能够特异地扩增155 bp 的片段,与双芽巴贝斯虫、环形泰勒虫、马泰勒虫、瑟氏泰勒虫均无交叉反应,能检测到的最低 DNA 拷贝数为5.17×10^2 copies/μL。应用所建立的方法检测了采集于和静县焉耆马匹样品,结果显示,马驽巴贝斯虫感染率为69.51%(57/82),与血液涂片检查结果37.8%(31/82)相比,其检出率更高。表明该二温式 PCR 检测方法具有较高的特异性和敏感性,可用于马驽巴贝斯虫病的早期诊断。