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猪瘟病毒 E0蛋白的原核表达及鉴定
作者: 郭东光 [1] ; 朱艳平 [1] ; 孙国鹏 [1] ; 岳峰 [1] ; 贾文科 [1] ; 王军 [1,2] ; 李鹏 [1,2] ; 王自浩 [1] ; 王选年 [1]
关键词: 猪瘟病毒 E0 蛋白 鉴定
摘要：为获得猪瘟病毒（CSFV）E0重组蛋白，建立 CSFV 抗体快速检测方法。本研究通过扩增 CSFV C 株 E0基因，亚克隆至原核表达载体 pGEX-4T-2，构建重组原核表达质粒 pGEX-4T-2-E0，转化至宿主菌Rostta（DE3）后进行诱导表达。SDS-PAGE 检测表明与目的蛋白大小一致，其分子质量大小为46 ku。优化重组蛋白表达条件，最终获得诱导表达的最佳温度为37℃，最佳 IPTG 浓度为0．1 mmol/L，并且目的蛋白以包涵体形式存在。Western blot 表明，目的蛋白能与 CSFV 兔化高免血清反应，表明该融合蛋白具有良好的抗原性。本研究为 CSFV 抗体检测试剂盒的研究奠定了基础。