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犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定
作者: 王铮 [1,2] ; 王铁成 [2,3] ; 冯娜 [2,3] ; 虞一聪 [1,2] ; 高玉伟 [2,3] ; 杨松涛 [2,3] ; 夏咸柱 [2,3]
关键词: 犬瘟热病毒 单克隆抗体 间接酶联免疫吸附试验 相加酶联免疫吸附试验
摘要：用纯化后的犬瘟热病毒免疫Balb/c小鼠，采用间接ELISA方法筛选分泌阳性抗体的杂交瘤细胞株，并挑选阳性孔进行亚克隆，用Vero细胞交叉反应试验及间接免疫荧光检测单克隆抗体的特异性。结果获得2株能稳定分泌抗犬瘟热病毒单克隆抗体细胞株，分别命名为062-1、062-2。实验室已有的一株单克隆抗体为6 H8。交叉反应试验及间接免疫荧光染色检测表明，3株单克隆抗体的特异性较好；经过体外连续传代及反复冻存、复苏，杂交瘤细胞均能稳定分泌特异性单克隆抗体。培养上清液及小鼠腹水间接 ELISA效价分别为1∶105和1∶108。相加试验表明，单克隆抗体062-1、062-2具有共同的表位，而单克隆抗体6 H8识别的位点与其他两株不同。