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鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条的研制和初步应用
作者: 宁官保 [1] ; 刘国莉 [2] ; 张鼎 [3] ; 李宏全 [1] ; 马海利 [1] ; 高荣琨 [1] ; 郝卫芳 [4] ; 高文伟 [1] ; 赵宇军 [1] ; 高诗敏 [1] ; 李建慧 [1] ; 李桂兰 [1] ; 闫芳 [1] ; 田文霞 [1]
关键词: 鸡毒支原体 胶体金 免疫层析 试纸条
摘要:为研制一种用于快速检测鸡毒支原体(MG)的胶体金免疫层析试纸条,采用直径20nm的胶体金颗粒标记纯化的MG多克隆抗体,硝酸纤维素膜检测线和质检线分别喷加纯化的MG多克隆抗体和兔抗鸡IgG抗体,制作胶体金试纸条。试纸条检测MG阳性显示两条红色反应条带;阴性为一条红色反应带。本试纸条可检测到1∶1 280倍稀释的MG抗原,即颜色变化单位为8×104 CCU/mL,具有高度的灵敏性。用试纸条检测衣原体、滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡大肠埃希菌和鸡白痢沙门菌等均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性。对试纸条检测呈MG阳性的38只病鸡进行MG培养验证,所得结果一致;同时对MG培养检测的另外95份病鸡样品进行试纸条测试比对,符合率为96.84%,证明该试纸条具有很高的准确性。该胶体金免疫层析试纸条检测MG操作简单,灵敏度、准确度、特异性等均符合要求,可以用于养殖场批量MG的检测。
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