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环形泰勒虫表面抗原Tasp-Spag1基因串联表达及其蛋白生物信息学分析
作者: 任方 [1,3] ; 易忠 [1] ; 米晓云 [1] ; 魏婕 [1] ; 马文戈 [1] ; 郭会玲 [1] ; 苗书魁 [1] ; 汪立群 [2] ; 王延 [1] ; 薛英 [1] ; 黄炯 [1] ; 魏玉荣 [1]
关键词: 环形泰勒虫 串联重组蛋白 原核表达 生物信息学
摘要：研究环形泰勒虫表面抗原特性,以原核表达系统串联表达其表面抗原Tasp-Spag1,并对其蛋白进行生物信息学分析。通过PCR技术扩增Tasp-Spag1基因片段后构建重组质粒pET-28a-Tasp-Spag1,IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE、Western blot检测;运用生物信息学软件对Tasp-Spag1基因片段进行分析,并预测其编码蛋白的主要特性与抗原表位。结果显示,扩增得到Tasp-Spag1基因长度为729bp,原核表达后通过SDS-PAGE与Western blot检测显示,得到大小与预期分子质量相当的目的蛋白;生物信息学分析发现,此串联重组蛋白Tasp-Spag1具有236个氨基酸,属于不稳定的非分泌型、非跨膜亲水蛋白,分别具有33个与21个可能的糖基化与磷酸化位点,有三段低复杂性的结构域,并且含有Sorb、NL的同源区域,可能有10个B细胞表位优势区段与7个T细胞表位优势区段,具有两段交叉反应性表位肽。