牛病毒性腹泻病毒抗原捕获ELISA方法的建立

作者: 范晴 ; 谢芝勋 ; 谢志勤 ; 刘加波 ; 庞耀珊 ; 邓显文 ; 谢丽基 ; 罗思思

关键词: 牛病毒性腹泻病毒 NS3单克隆抗体 ELISA

摘要：用兔抗牛病毒性腹泻病毒（BVDV）多抗作为包被抗体,BVDV NS3单克隆抗体作为捕获抗体,建立了检测BVDV抗原的捕获ELISA方法,对各项反应条件进行优化,最终获得最佳工作条件为兔多抗1∶1 600稀释包被,NS3单抗1∶2 000稀释,酶标抗体工作浓度为1∶4 000稀释。特异性和敏感性试验结果表明,该方法对牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛分支杆菌无特异性交叉反应,其最低可检测7.9×10^3个TCID50的病毒量,与RT-PCR方法的相比较,符合率为100%。所建立的BVDV抗原捕获ELISA方法快速、特异、敏感,可用于BVDV抗原的检测。

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