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猪圆环病毒2型Cap蛋白的纯化与鉴定
作者: 周景明 贾蕊 刘红亮 祁艳华 聂守一 陈冰 张改平 王爱萍
关键词: 猪圆环病毒2型 核衣壳蛋白 蛋白纯化 鉴定
摘要:为了获得具有良好免疫原性的猪圆环病毒2型重组Cap蛋白,对pET-28a-ORF2-BL21重组菌种进行IPTG诱导表达,利用镍亲和层析法纯化可溶性重组蛋白,并利用Western blot和ELISA鉴定其免疫反应性.结果表明,表达的重组蛋白分子质量约为 26 ku,主要以可溶性蛋白的形式存在,纯化后的蛋白纯度可达到 90%以上,浓度为1.31 mg/mL,产量为30.6 mg/L菌液.Western blot和间接ELISA证实,重组蛋白能够与PCV2阳性血清反应.结果表明,所制备的Cap蛋白具有较高的纯度和较好的免疫反应性,有望用于PCV2抗体检测免疫试纸的研制.
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