表达鸡α干扰素重组酿酒酵母菌的构建与鉴定

作者: 杜伟立尹美辰杨理凯张涛王令路宏朝

关键词: 略阳乌鸡鸡α-干扰素真核表达载体酿酒酵母

摘要：通过构建鸡α干扰素真核表达载体,以获得能够表达鸡α干扰素的酵母工程菌株.首先根据GenBank公布的鸡α干扰素基因序列设计上、下游引物,以略阳乌鸡基因组DNA为模板,PCR扩增鸡α干扰素基因片段.然后,利用基因重组技术将鸡α-干扰素基因插入真核表达载体,通过菌落PCR和DNA测序确定目标载体,构建成功后转化至酿酒酵母AH109,再通过营养缺陷培养、质粒提取和PCR鉴定带JMB440-ChIFN-α载体的重组酵母菌株.最终通过酵母培养、总蛋白收集、SDS-PAGE电泳和Western blot等,确定鸡α干扰素基因能够与酵母菌株重组,并表达α干扰素,蛋白条带大小约为23 ku,与预期结果一致,表明成功构建了表达鸡干扰素基因的工程酵母菌株.

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表达鸡α干扰素重组酿酒酵母菌的构建与鉴定

作者: 杜伟立 尹美辰 杨理凯 张涛 王令 路宏朝

关键词: 略阳乌鸡 鸡α-干扰素 真核表达载体 酿酒酵母

作者: 杜伟立尹美辰杨理凯张涛王令路宏朝

关键词: 略阳乌鸡鸡α-干扰素真核表达载体酿酒酵母