冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响

摘要：研究冷冻保存前平衡温度对精子结构的影响，为提高猪精子冷冻效果提供参考。新鲜猪精液（Ⅰ组）稀释后于17℃过夜保存（Ⅱ组），然后于冷冻Ⅰ液中4℃平衡1．5h（Ⅲ组），再加入预冷的冷冻Ⅱ液于4℃平衡45min（Ⅳ组）。通过精子形态正常率及活力检测，吖啶橙（AO）染色检测精子DNA完整性，碘化丙啶（PI）染色检测精子头部质膜完整性，低渗肿胀试验（HOS）检测精子尾部质膜完整性，异硫氰荧光素标记的花生凝集素（FITC—PNA）染色检测精子顶体完整性，并用扫描电镜（SEM）观察精子结构，评价冷冻保存前平衡温度对猪精子结构的影响。结果表明，与新鲜精液相比，Ⅱ组精液的精子DNA完整性、质膜完整性、顶体完整性等精子结构检测指标所受影响无统计学意义（P〉0．05）；HI组和Ⅳ组的精子结构检测指标明显受到影响（P〈0．05），但Ⅲ组和Ⅳ组间无显著差异（P〉0．05）。扫描电镜检测结果表明，17℃过夜保存精子未见异常，头、颈、尾结构完整，顶体完整、光滑；Ⅲ组精子头部质膜及头颈结合部有轻微损伤；Ⅳ组精子尾部和头颈结合部有不同程度的断裂。冷冻前从17℃降低至4℃及4℃平衡对猪精子结构有一定程度的损伤。