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猪五种繁殖障碍性疫病病原体多重PCR的建立及初步应用
作者: 王苗苗 张凡庆 王曼 朱建国 上海交通大学农业与生物学院/上海市兽医生物技术重点实验室 上海200240
关键词: 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒2型 猪细小病毒 多重聚合酶链反应
摘要：为了建立能够同时检测猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）和猪细小病毒（PPV）的多重PCR,并用于猪场感染情况的动态监控以及临床诊断,根据GenBank中已发表的5种病毒的基因序列,针对CSFV的E2、PRRSV的Nsp2、PRV的gB、PCV2的ORF2和PPV的VP2基因,分别设计了特异性引物。在建立的单项PCR基础上,通过优化反应条件,建立了能同时检测5种病毒的多重PCR,并具有较高的灵敏性和良好的特异性。采用建立的多重PCR对127份疑似病猪的扁桃体活体组织进行检测,检出了5种病毒的存在,其中感染2种及以上病毒的样品比例为38.6%（49/127）,表明该方法是一种快速、灵敏、高效的病原学检测手段。
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