基于DNA-launched的猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统的建立

作者: 曹宗喜 [1,2] ; 焦培荣 [2] ; 谭树义 [1] ; 叶保国 [1] ; 亓文宝 [2] ; 张桂红 [2]

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统构建

摘要：为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）反向遗传操作系统,将PRRSV全基因组分6段克隆,构建获得6个重组质粒,先由A1和A2片段或B1和B2片段连接构成A片段或B片段,然后D、C、B和A片段依次亚克隆入pOKq载体。在基因组5′端和3′端分别加上CMV启动子序列和BGH终止信号肽,全基因组510位核苷酸突变引入遗传标记位点FseⅠ。测序正确的全基因组质粒命名为pOK-A2BCD。再将pOK-A2BCD质粒转染BHK-21细胞,拯救病毒通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光试验（IFA）鉴定,结果表明拯救病毒成功,为进一步研究PRRSV致病性等相关分子机制奠定了基础。

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基于DNA-launched的猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统的建立

作者: 曹宗喜 [1,2] ; 焦培荣 [2] ; 谭树义 [1] ; 叶保国 [1] ; 亓文宝 [2] ; 张桂红 [2]

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 反向遗传操作系统 构建

关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统构建