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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅠA蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备
作者: 王海丽 [1,2] ; 葛长城 [1] ; 徐公义 [1] ; 赵德明 [2]
关键词: 胸膜肺炎放线杆菌 单克隆抗体 ApxⅠ A 小鼠
摘要：以猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）血清10型标准株ApxⅠ天然外毒素为免疫抗原，接种Balb／c小鼠；设计编码ApxⅠN一端具有保护性抗原表位apxIA基因（1149bp）的引物，构建原核表达载体pET-32a-apxⅠA，转化至E-coliBL21，获得分子质量约为41ku的rApxⅠA作为包被抗原，用间接ELISA方法筛选单克隆融合细胞上清，共获得2株稳定分泌抗ApxⅠA蛋白mAb的杂交瘤细胞系，亚类鉴定分别为IgG3、IgG2a，2株mAb能特异性地识别ApxⅠA蛋白，为ApxⅠA诊断试剂的研究奠定了基础。