毕赤酵母工程菌株表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白发酵条件的优化

作者: 高宇 [1] ; 赵红蕾 [1] ; 冯新 [1] ; 刁昱文 [1] ; 刘珊珊 [1] ; 李林溪 [1] ; 顾敬敏 [1] ; 韩文瑜 [1] ; 雷连成 [1]

关键词: 毕赤酵母人溶菌酶-鲎素融合蛋白表达条件优化

摘要：能分泌表达重组人溶菌酶-鲎素融合蛋白的巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）工程菌（X33/pPICZαA-human lysozyme-TachyplesinⅠ构建的）。除了基因本身内在特性外,表达条件对外源基因的表达量也有着极显著的影响。本文在摇瓶水平上通过发酵液起始pH、甲醇诱导浓度、诱导时间这3个因素进行表达条件优化。通过生长曲线,Bradford检测以及平板扩散试验分析,获得摇瓶发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白的最佳条件为发酵液初始pH 5.0,甲醇诱导浓度为2.0%,诱导时间为72 h;Bradford检测法分析显示表达量最高,平板扩散试验显示融合蛋白对金黄色葡萄球菌（ATCC25923）抑菌能力最明显,为进一步大规模发酵表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白奠定了基础。

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毕赤酵母工程菌株表达人溶菌酶-鲎素融合蛋白发酵条件的优化

作者: 高宇 [1] ; 赵红蕾 [1] ; 冯新 [1] ; 刁昱文 [1] ; 刘珊珊 [1] ; 李林溪 [1] ; 顾敬敏 [1] ; 韩文瑜 [1] ; 雷连成 [1]

关键词: 毕赤酵母 人溶菌酶-鲎素融合蛋白 表达条件 优化

关键词: 毕赤酵母人溶菌酶-鲎素融合蛋白表达条件优化