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奶山羊IL-1β在Sf9细胞中的表达
作者: 姚婧 [1] ; 赵莉娟 [1] ; 敬晓棋 [1,2] ; 赵光辉 [1] ; 陈德坤 [1]
关键词: 奶山羊 IL-1β SF9细胞
摘要:将CaIL-1β基因整个编码区cDNA亚克隆到杆状病毒载体pFastBac-HTb中,构建转移载体pFastBac-HTb-CaIL-1β,转座到宿主菌DH10 Bac中,在Kan^+/Gm^+/Tet^+/X-gal/IPTG LB平板上筛选白色菌落,碱裂解法提取质粒即为穿梭载体Bacmid-CaIL-1β,转染Sf9细胞后获得有感染力的重组病毒re-Bac-CaIL-1β。重组病毒在Sf9细胞上来连续传代后,经Western blot检测,CaIL-1β主要表达于感染的Sf9细胞培养上清中。