O型口蹄疫病毒VP1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

作者: 王云龙 [1,2] ; 孙强 [1] ; 昌静峰 [3] ; 李玉林 [3] ; 王国强 [3] ; 董彩文 [3] ; 刘旺根 [3] ; 梁晓艳 [3] ; 孙新城 [3]

关键词: 口蹄疫病毒 VP1基因原核表达间接ELISA

摘要：表达O型口蹄疫病毒VP1蛋白,用于O型口蹄疫病毒的检测。以质粒T234/FMDV为模板,PCR扩增VP1基因片段,构建重组质粒pET-41b/VP1,转化表达菌BL21（DE3）,IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot进行分析检测,目的蛋白经镍离子亲和层析纯化,以纯化的目的蛋白包被,建立了间接VP1-ELISA检测方法。VP1基因表达的蛋白主要以包涵体形式存在,复性后具有免疫反应性,方阵滴定法确定了包被抗原的最佳工作浓度（1 mg/L）,最佳的酶结合稀释度为1∶8 000,检测结果特异性好。O型口蹄疫病毒VP1基因可在表达载体pET-41b中表达,并建立了O型口蹄疫病毒检测方法。

O型口蹄疫病毒VP1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

作者: 王云龙 [1,2] ; 孙强 [1] ; 昌静峰 [3] ; 李玉林 [3] ; 王国强 [3] ; 董彩文 [3] ; 刘旺根 [3] ; 梁晓艳 [3] ; 孙新城 [3]

关键词: 口蹄疫病毒 VP1基因 原核表达 间接ELISA

关键词: 口蹄疫病毒 VP1基因原核表达间接ELISA