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猪圆环病毒2型不对称PCR检测方法的建立
作者: 杨泽晓 [1,4] ; 韩雪清 [3] ; 王印 [1] ; 姚学萍 [1] ; 杨增岐 [2] ; 张彦明 [2] ; 汪开毓 [1]
关键词: 猪圆环病毒2型 不对称PCR 方法建立
摘要:为研究制备单链DNA的方法,根据GenBank已发表的PCV-2全基因组序列,设计合成2条特异性引物和1条通用引物,通过pGM-T-PCV-2重组质粒的构建、引物浓度优化、单链PCR产物的杂交测序鉴定,以及敏感性和特异性试验,对PCV-2不对称PCR方法进行了研究。结果显示,上、下游引物用量比为20∶1~40∶1时,可明显扩增出457 bp大小的单链和双链特异性目的片段,不对称PCR敏感性和对称PCR相一致,CSFV、PRV、PPV核酸扩增均为阴性,具有良好的特异性和敏感性。PCV-2不对称PCR方法的建立,为基因芯片制备的相关研究奠定了基础。
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