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猪脑心肌炎病毒GXLC株VP1基因的原核表达及鉴定
作者: 李向涛 [1] ; 施开创 [2] ; 陈宏备 [1] ; 郑敏 [2] ; 钟诚 [1] ; 李军 [2]
关键词: 脑心肌炎病毒 VP1基因 原核表达 抗原性 猪
摘要：根据猪脑心肌炎病毒（EMCV）GXLC株的基因组序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增EMCV VP1基因目的片段,将其克隆至原核表达载体pET-32a（＋）,构建了EMCV VP1基因重组表达质粒pET-32a-VP1。将pET-32a-VP1转化BL21（DE3）株感受态细胞,并用IPTG进行诱导表达。结果显示,经SDS-PAGE分析,VP1蛋白获得高效表达,融合蛋白质的分子质量约为52 ku,表达的重组蛋白以包涵体形式存在。经Western blot,结果显示所表达的VP1蛋白与猪抗EMCV阳性血清发生特异性的免疫印迹反应,表明其具有良好的抗原反应原性。