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猪传染性胃肠炎病毒陕西分离株S蛋白抗原位点的真核表达
作者: 宋林林 [1] ; 王晓红 [1] ; 姜博 [1] ; 赵毅 [2] ; 王祥 [3] ; 穆杨 [1]
关键词: 猪传染性胃肠炎病毒 S基因 抗原位点 真核表达
摘要：猪传染性胃肠炎（TGE）是严重危害全世界养猪业健康发展的一种高度传染性病毒病,其病原猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）的S蛋白携带有主要的B淋巴细胞识别的抗原决定簇,是诱导机体产生保护性中和抗体的主要抗原。本研究以提取的TGEV陕西分离株感染的ST细胞的RNA为模板,采用RTPCR方法扩增编码S蛋白上包含C、B、D、A 4个抗原位点的基因片段,将目的片段连接到真核表达载体pcDNA3.1/V5-HisB上,构建重组表达载体,转染293T细胞后,通过Western blot检测目的基因的表达。结果成功克隆到编码S蛋白C、B、D、A 4个抗原位点的基因片段,以TGEV阳性猪血清和抗His标签单抗的Western blot结果均显示,目的基因在293T细胞中获得表达。本研究为TEG核酸疫苗的研制奠定了基础。