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犬IFN-γ的原核表达及其对A型流感病毒H3N2亚型的抑制作用
作者: 秦海斌 ; 朱海娟 ; 朱骞 ; 宋珍华 ; 温海 ; 贺星亮 ; 高一龙
关键词: 犬 γ干扰素 原核表达 流感病毒
摘要：为研究犬的7干扰素（IFN-γ）对犬流感病毒H3N2亚型的抑制作用，由经ConA诱导过的健康犬淋巴细胞中特异性地扩增犬IFN-γ（cIFN-γ）基因，构建重组原核表达载体pET-cIFN-γ，转化宿主菌BL21（DE3）中进行诱导表达，以MDCK—VSV法对纯化后产物进行抗病毒活性鉴定，并在MDCK细胞上测定对H3N2亚型犬流感病毒的抑制作用。结果表明，表达产物以包涵体形式存在，经变性、复性、纯化后，所制备犬IFN-γ的抗病毒活性为1．1×105U／rag，重组犬IFN-γ稀释2。倍后对犬流感病毒的增殖仍具有明显抑制作用。本研究成功表达了具备抗H3N2亚型流感病毒活性的犬IFN-γ，为犬流感病毒新型药物的开发奠定了基础。