绵羊脑炎单增李斯特菌生物膜形成及相关基因的检测

摘要：为了检测绵羊脑炎李斯特菌生物膜形成情况并确定生物膜形成相关基因在该菌中的分布情况，采用结晶紫染色结合测定oD值的方法观察羊脑炎李斯特菌生物膜在不同时间段形成情况，并应用分子生物学方法检测生物膜形成相关基因（{laA、recA、relA、prfA、yneA、agrA、luxS、degU、motB、sigB、hpt）在该菌中的分布情况。结果表明，在37℃，绵羊脑炎李斯特菌生物膜在2h～8h的OD值与0h和对照组对比差异显著（P〈0．05），9h～48hOD值呈平稳趋势，与对照组比较差异显著（P〈0．05）。2h开始生物膜初具形态，呈现散落的网格结构，2h～6h矩阵网格结构明显，6h～8h形成高度有序的网格结构，9h～48h依然具备生物膜网状结构特征，但个别网状结构脱落。11种生物膜相关基因在绵羊脑炎李斯特菌中的检测结果为阳性，测序结果与GenBank公布的相应序列同源性为87．22％～99．29％。结果表明2h～6h生物膜进入黏附期和生长期，6h～8h进入成熟稳定阶段，9h～48h逐渐进入播散期；LM90携带11种与生物膜形成相关的基因。