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表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组杆状病毒的构建及鉴定
作者: 张永武 ; 连海 ; 张锦霞 ; 张静远 ; 刘晔 ; 张守峰 ; 扈荣良
关键词: 猪圆环病毒2型 Cap蛋白 杆状病毒表达系统
摘要:利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统成功表达了猪圆环病毒2型Cap蛋白,并对该蛋白的生物活性进行鉴定。PCR获得Cap基因并克隆入pFastBacTMⅠ载体质粒,重组质粒pFastBacⅠ-Cap转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒rBacmid-Cap。以脂质体法将重组杆粒转染对数生长期的Sf9细胞,获得重组杆状病毒。电镜下可见典型的杆状病毒,SDS-PAGE显示,重组病毒表达的Cap蛋白约28ku,间接免疫荧光试验证明,Cap蛋白良好表达并具有免疫反应性,为猪圆环病毒亚单位疫苗的研究奠定了基础。
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