蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞凋亡过程中的作用

摘要：为探究蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞（MEFs）凋亡过程中的作用,用Cβ＋/-的杂合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取胚胎期12.5d（E12.5）的胚胎制备MEFs,用PCR、RT-PCR和Western blot方法进行基因型鉴定。同时对P3代MEFs利用流式分选技术检测其细胞凋亡和细胞周期的变化,并采用Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结果采用胰酶消化方法成功获得了MEFs,DNA、RNA和蛋白水平鉴定显示获得了3对3的野生型和Cβ基因敲除MEFs。流式分选发现Cβ基因敲除MEFs和野生型之间细胞分裂期前期（M1期）细胞分别为53.95%±2.81和46.94%±4.17,细胞分裂期后期（M2期）细胞分别为21.14%±2.53和29.83%±3.25。但Bcl-2的蛋白表达量和mRNA表达量没有显著差异。结果表明,虽然蛋白磷酸酶2A的Cβ亚基的缺失并不会导致小鼠胚胎死亡,但Cβ亚基的缺失会轻微影响胚胎成纤维细胞（MEFs）的细胞周期。