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布鲁菌S2疫苗株的核酸探针检测方法的建立
作者: 张岩 [1] ; 李建 [1] ; 宫利娜 [1] ; 高航飞 [1] ; 李旭东 [1] ; 安维雪 [1] ; 申之义 [1]
关键词: 布鲁菌 检测技术 斑点杂交
摘要:为了鉴别布鲁菌疫苗免疫和自然感染,建立鉴别布鲁菌S2疫苗株与其他菌株的斑点杂交法。针对布鲁菌基因序列保守区S2疫苗株与其他菌株的差异设计探针,同时根据差异部分设计引物进行PCR扩增;PCR产物经过回收、纯化、变性后固定在NC膜上,与探针杂交、显色。结果显示,PCR引物能够对s2疫苗株扩增出约330bp的核酸片段,对其他布鲁菌扩增出约3G0bp的核酸片段;探针只能和S2疫苗株的PCR产物杂交,最低检测到10PgDNA,能够在10h内鉴别出布鲁菌S2疫苗株。
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