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  《动物医学进展》原名《国外兽医学—畜禽疾病》,是中华人民共和国教育部主管西北农林科技大学主办的专业性学术期刊,1980年创刊,主要刊载动物医学领 ...

猪呼吸道病相关的常见病毒PCR/RT-PCR检测方法的建立

作者: 韦冠东 [1] ; 王洪光 [1] ; 马萍 [2] ; 汤德元 [1] ; 张元鑫 [1] ; 曾智勇 [1] ; 刘霞 [2] ; 唐宇 [2] ; 李达 [1]

关键词: 猪伪狂犬病病毒 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪细小病毒 猪流感病毒 PCR RT-PCR方法

摘要:为建立猪呼吸道病相关的几种病毒PCR/RT-PCR检测方法,根据GenBank登录的猪伪狂犬病病毒(PRV,gB,AF257079)、猪圆环病毒2型(PCV-2,ORF2,NC-005148)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV,ORF6,NC-001961)、猪瘟病毒(CSFV,C,AY805221)、猪细小病毒(PPV,NS1,NC-001718)和猪流感病毒(SIV,M,GU086140)6种常见病毒的相关保守基因序列分别设计一对特异性引物,通过对其条件的优化,建立了检测以上6种病毒的PCR/RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为192bp(PRV)、255bp(PCV-2)、364bp(PRRSV)、530bp(CSFV)、759bp(PPV)和981bp(SIV)。通过试验证明该检测方法具有良好的特异性和敏感性,对该6种病毒的核酸检测最小量依次为2.5×10-3ng、2.2×10-4ng、3.2×10-3ng、8.3×10-3ng、3.7×10-3ng和3.7×10-3ng,为检测以上6种病毒提供了参考。


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