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猪轮状病毒 NSP4的细胞定位及在细胞凋亡中的作用
作者: 建琛瑶 ; 王静 ; 董望 ; 张彦明
关键词: 猪小肠上皮细胞 猪轮状病毒 非结构蛋白 4 细胞凋亡 NSP4
摘要:为研究猪轮状病毒非结构蛋白 NSP4的细胞定位及其蛋白功能,将构建的重组质粒 pNSP4-EGFP,pviroporin-EGFP 和 pEGFP-N1空载体质粒转染到 SIEC02细胞株,通过与内质网定位蛋白的共聚焦分析、实时荧光定量 PCR 检测和 Western blot 分析,发现 NSP4主要分布于内质网,少数定位于细胞核;NSP4蛋白可显著上调 Bax 基因水平(P <0.01)和 caspase-3蛋白表达水平。说明猪轮状病毒 NSP4蛋白具有类似 viroporin 的功能,主要定位于内质网上;NSP4依赖或部分依赖 caspase 的激活和 Bax 的活化促进细胞凋亡。
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