一株 Nsp2蛋白自然缺失123个氨基酸的 PRRSV 分离和鉴定

摘要：通过 RT-PCR 方法检测到一份猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）阳性肺组织病料。将该病料研磨、过滤后感染 Marc-145细胞，连续传代都能产生明显的细胞病变。为鉴定细胞病变是否由 PRRSV引起，抽提细胞总 RNA，通过 RT-PCR 的方法成功的检测到了 PRRSV 基因。同时用间接免疫荧光方法证实了感染的细胞内有 PRRSV N 蛋白的表达。将成功分离的毒株命名为 GXYL1403株。对分离株的 ORF5基因和 Nsp2高变区进行扩增、克隆和遗传进化分析，结果发现该毒株 Nsp2高变区与 NCBI 登录的参考序列 VR-2332氨基酸同源性为68．6％，JXA1的同源性为90．8％。通过 ORF5遗传进化分析该分毒株为北美型 PRRSV，且与高致病性 PRRSV 分布在同一个小分支上。Nsp2序列对比显示该分离株 Nsp2蛋白含有高致病性 PRRSV 特异的1＋29个氨基酸的缺失。特别的是，在缺失29个氨基酸区域的上游，含有连续20个氨基酸缺失，在下游更出现了连续73个氨基酸的缺失。该 PRRSV 毒株的分离和 Nsp2蛋白部分序列的缺失鉴定，为下一步研究 Nsp2部分氨基酸缺失对病毒生物学特性影响奠定了基础。